近年来,各式各样的病毒接连侵入我们的生活,令大家深恶痛绝!非洲猪瘟、新冠、猴痘等等病毒,严重影响了养殖业的发展以及人们的日常生活。因此,病毒的早期筛查、科学研究以及疫苗开发工作至关重要,而病毒核酸提取便是其中最基础的环节。那么,与提取细胞本身的核酸相比,病毒核酸提取方案需要克服哪些难点呢?
一方面,病毒只含有一种遗传物质DNA或RNA,除反转录病毒外,病毒的基因只有一个拷贝且基因组长度不及细胞的万分之一,操作过程中十分容易丢失;另一方面,我们通常需要从各种动物组织、血液、粪便、环境等复杂的样本中提取病毒核酸,样本杂质多、成分复杂的特点更让病毒核酸提取难上加难。
总而言之,想要提取病毒核酸并不容易,不少人因为提取试剂性能不过关,从而影响了病毒的检测或其它后续实验。为了减少大家的这种“烦恼”,小V给大家倾力推荐两款诺唯赞新品试剂盒-升级款柱式病毒DNA/RNA提取试剂盒, 集速度快、兼容广、性能稳于一身,为您轻松提取病毒核酸保驾护航~
FastPure® Viral DNA/RNA Mini Kit V2(Vazyme #RC313)适用于从全血、血清、血浆、拭子、口腔液、组织、粪便、精液、环境等多种样本中快速提取高纯度的病毒DNA/RNA。试剂盒采用独特的裂解、结合体系,只需准备样本,无需其他试剂(如乙醇、异丙醇等),也无需进行高温孵育,经过硅胶膜的特异性吸附,可快速高效纯化病毒DNA/RNA。
FastPure® Viral DNA/RNA Mini Kit Pro(Vazyme #RC323)适用于从全血、血清、血浆、拭子、组织、肺泡灌洗液、细胞培养上清液等多种样本中快速提取高纯度的病毒DNA/RNA。试剂盒采用独特的裂解体系,无需高温孵育,搭配Carrier RNA可显著提高微量核酸的回收率,经过硅胶膜的特异性吸附,可快速高效纯化病毒DNA/RNA。
● 简单快速:常温操作11 min即可
● 试剂预混:无需额外准备醇类试剂
● 样本兼容性广:适用于全血、血清、血浆、拭子、口腔液、组织、粪便、精液、环境等多种样本
● 简单快速
Vazyme #RC313拿来即用,操作简便,常温操作11 min即可(图1)。
图1.核酸提取操作流程
● 样本兼容性广
检测不同类型模拟样本中的非洲猪瘟病毒(ASFV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪轮状病毒(PoRV)。参照Vazyme #RC313(V)和其他厂家同类产品(A、B、C、D、E、F、G、H、I)提取流程进行提取,使用qPCR对提取产物进行检测,平均Ct值越低,表明提取效率越高。结果表明,Vazyme #RC313对不同样本中DNA和RNA病毒的提取效率优于或持平于其他厂家同类产品,尤其在全血样本上提取效率有显著优势(图2)。
图2.提取产物qPCR定量结果
优秀案例—RC313
体验官A-武汉某实验室
体验官B-青岛某实验室
体验官C-北京某实验室
体验官D-济南某实验室
客户端测试结果表明:RC313能够有效提取不同类型样本中的病毒或部分其他病原核酸:如猪全血中的PRRSV(猪繁殖与呼吸综合征病毒),粪便拭子中的TGEV(猪传染性胃肠炎病毒)、PoRV(猪轮状病毒),猪唾液和猪全血中的ASFV(非洲猪瘟病毒)以及细胞悬液中的支原体等。提取流程简便快速且提取性能具有优势。
● 提取效率高:轻松捕获微量核酸
● 快速提取:常温操作12 min即可
● 样本兼容性广:适用于全血、血清、血浆、拭子、组织、肺泡灌洗液、细胞培养上清液等多种样本
● 快速提取微量核酸
检测不同稀释梯度下胎牛血清模拟样本中的低浓度非洲猪瘟病毒(ASFV)和低浓度猪流行性腹泻病毒(PEDV)。参照Vazyme #RC323(V)和A厂家同类产品提取流程进行提取,使用qPCR对提取产物进行检测,平均Ct值越低、检出数量越多,表明提取效率越高。结果表明,Vazyme #RC323对低浓度病毒样本的提取效率优于A厂家同类产品(图3)。
图3 低浓度样本提取产物qPCR结果
● 兼容多种复杂样本
检测胎牛血清、猪血、肺泡灌洗液、咽拭子、唾液和Hela细胞培养液等模拟样本中的伪狂犬病病毒(PRV)和猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)。参照Vazyme #RC323(V)和A厂家同类产品提取流程进行提取,使用qPCR对提取产物进行检测,平均Ct值越低,表明提取效率越高。结果表明,Vazyme #RC323对不同样本中DNA和RNA病毒的提取效率基本优于A厂家同类产品(图4)。
图4.不同类型样本提取产物qPCR结果
优秀案例—RC323
体验官E-广州某实验室
体验官F-昆明某实验室
客户端测试结果表明:RC323能够有效提取不同类型样本中的病毒核酸:如细胞培养上清液中的PEAV(猪肠道致病阿尔法冠状病毒),鸡胚尿囊液中的H1N1(甲型H1N1流感病毒)等。提取流程快速,且提取性能具有优势。
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