书名：动物学实验教程（第三版）
定价：30.0
ISBN：9787030440839
作者：孙虎山 编
版次：3
出版时间：2015-04

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第*部分基础性实验 第*章动物的细胞和组织 细胞是生物体结构和功能的基本单位？动物细胞的形态虽然多样,但结构上都是由细胞膜？细胞质和细胞核三部分构成的？在多细胞动物中,一群相同或相似的细胞及其非细胞物质彼此以一定的形式连接并形成一定的结构？担负一定的功能,即为动物的组织？根据结构和功能的差别常将动物组织分为上皮组织？结缔组织？肌肉组织和神经组织四大基本类型？ 实验1显微镜的使用及人口腔上皮细胞的观察 显微镜是研究生命科学的重要科学仪器之一？对显微镜的熟练使用,是生命科学研究者必须具备的*基本的技能？人口腔上皮细胞薄而透明,对其进行显微观察,有助于学生更好地掌握显微镜的使用方法,并了解动物细胞的基本结构？ 【目的要求】 1.了解普通光学显微镜的基本结构及各部分的功能,掌握显微镜的使用方法？ 2.学习动物细胞的临时制片方法？ 3.了解动物细胞的基本结构？ 【材料与用品】 1.材料 人口腔上皮细胞？ 2.用具和药品 显微镜？载玻片？盖玻片？吸管？擦镜纸？吸水纸？牙签？0.1%亚甲蓝？0.9%NaCl溶液？二甲苯？香柏油？蒸馏水？ 【实验步骤】 1.显微镜的构造 普通光学显微镜的构造可分为两大部分,即用以装置光学系统的机械部分和保证成像的光学部分？ (1)机械部分 1)镜座位于镜体的*下端,呈马蹄形,支持镜体,使之放置稳固？ 2)镜柱镜座上面的直立短柱,支持镜体上面的各部分？ 3)镜臂弯曲如臂,下连镜柱,上连镜筒,起支持作用,也是取放显微镜时手握的部分？有的显微镜在镜柱与镜臂连接处还有倾斜关节,可使镜体在一定的范围内后倾以便于观察？ 4)载物台放置玻片标本的平台,中央有一通光孔？有的台上两旁装有两个弹性金属片,称压片夹,用以固定玻片标本？有的则在载物台上装有机械移动器以固定玻片标本,利用移动器的操作钮可使玻片标本前后左右移动？ 5)镜筒镜臂上部圆形中空的金属圆筒,上端放置目镜,下端与物镜转换器相连,其作用是保护成像的光路和亮度？ 6)物镜转换器接于镜筒下端的圆盘,其上有3~4个螺旋圆孔,用于安装物镜,物镜转换器可左右转动,便于交换使用各种不同倍数的物镜？ 7)调焦装置又称调焦器？位于镜柱或镜筒两侧,有大小调焦螺旋各一对,旋转时可使载物台或镜筒上下移动？大的调节幅度大,旋转一周可使镜筒移动20mm左右,称为粗调焦螺旋;小的调节幅度小,旋转一圈可使镜筒移动0.1mm或更小,称为细调焦螺旋？调焦装置的作用是调节物镜与标本之间的距离,使之与物镜的工作距离相等,以得到清晰的图像？ (2)光学部分:光学部分是显微镜的主要部分,由成像系统和照明系统组成,成像系统包括目镜和物镜？ 1)目镜圆筒形,安装在镜筒的上端,其上标有“5×”？“10×”？“16×”等字样,即代表放大5倍？10倍？16倍的意思？目镜可以向上抽出,根据需要更换不同放大倍数的目镜？ 2)物镜安装在镜筒下端的转换器上,根据放大倍数不同,物镜可分为低倍镜(一般有4×？10×)？高倍镜(一般为40×)和油镜(100×)？物镜的作用是将物体作第1次放大,目镜是将物镜所成的像再一次放大？整个显微镜的放大倍数等于目镜与物镜放大倍数的乘积？例如,目镜是10×,物镜是40×,则放大倍数为10×40=400(倍)？ 3)聚光器位于载物台圆孔的下方,由一组透镜组成,有集射光线聚焦于物体的作用？ 4)可变光阑聚光器附近有一组由金属片组成的可变光阑,其侧面伸出一光阑杆,可前后移动使光阑开闭？光阑开大则光线较强,适于观察色深的物体;光阑缩小则光线较弱,适于观察透明(或无色)的物体？ 5)电光源在聚光器正下方的镜座上,有一内置的电光源？光源位于镜座内靠后方,在镜座右侧有光源按钮,此按钮可前后移动,以调节光线的强弱？也有的电源开关在镜座后侧,在另一侧有光量调节器？旧式显微镜采用外光源,在聚光器正下方有一反光镜,可将光线反射至聚光器？此镜一面平,一面凹？凹面具有较强的反光性,多用于光线较暗的情况下？光线较强时用平面镜？ 2.显微镜的使用 (1)放置:将显微镜放置桌上时,动作要轻,防止震动,放置的位置是在使用者左侧,使显微镜的后方离桌子边缘5~10cm处,以便于观察和防止由台面滑落地上？ (2)对光:使双筒目镜对着观察者(旧式显微镜镜臂向着自己),摆好显微镜？转动粗调焦螺旋,使物镜与载物台相距约2cm,转动物镜转换器,使低倍镜对准载物台孔？两眼对着双筒目镜,移动瞳距调节板,使瞳距适于自己,再进行观察(如为单筒目镜,则两眼睁开,用左眼看)？打开*源按钮,向前向后移动,当视野(即从镜内看到的圆形部分)呈现一片均匀的白色时即可？如为旧式外光源显微镜,则可打开可变光阑,用手翻动反光镜,使其正对着光源,但不可对着直射的阳光,调节光线至适宜强度？ (3)低倍镜的使用:光线调好后,取一标本装片放在载物台上,使标本正对着载物台孔,用标本移动器卡紧固定标本玻片？然后调焦,转动粗调焦螺旋调节低倍物镜与载物台间的距离,从侧面观察,使物镜距玻片约5mm？再由目镜观察,如果标本未全在视野中,可调节标本移动器,同时慢慢转动粗调焦螺旋,至视野内标本清晰为止,此后改用细调焦螺旋,稍加调节焦距,使物像*清晰(转动标本移动器旋钮,上下左右轻轻移动玻片,视野中物像的移动方向如何?原因是什么?)？ (4)高倍镜的使用:如观察材料的某一部分需要继续放大时,则将要放大的部分移到视野中央,然后转动物镜转换器,移开低倍镜,转换高倍镜,此时也要用双眼在镜筒左侧观察,避免镜头与玻片相撞？如果转换高倍镜有困难,则需要稍向上提高镜筒,以防压碎玻片和损伤镜头？然后由目镜向下观察,在正常的情况下,当高倍镜转正后,视野中即可见到模糊的物像,只要略微调整细调焦螺旋,就可获得清晰的图像？如果视野中看不到图像,应重新调整焦点,即还要从侧面注视物镜,并小心转动粗调焦螺旋,使镜筒慢慢下降到镜头几乎与玻片相接触时,再由目镜向下观察,同时缓慢转动粗调焦螺旋,使镜头慢慢远离玻片直至看到物像,再用细调焦螺旋调至能看到*清晰的物像？在换高倍镜时,由于视野变小变暗,应开大光阑,调高视野亮度？观察完毕后,将物镜转换为低倍镜后,方可取下玻片(为什么这样操作?)？ (5)油镜的使用:用油镜观察前,必须先用低倍镜观察,将要观察的部分放在视野的*中央,然后提升镜筒约2cm,转动物镜转换器,将低倍镜转换成油镜？再在玻片的镜检处滴一滴香柏油,注意不要移动玻片？从侧面注视,下降镜筒,使油镜浸在香柏油中,其镜头几乎与标本相接,动作要轻,要特别注意油镜不能压在玻片上,以免压碎玻片,损坏油镜？然后由目镜观察,先用粗调焦螺旋将镜头慢慢远离玻片至看见物像,再由细调焦螺旋调节清晰？如果油镜已离开油面而仍未见到物像,应再下降镜筒,重复以上操作,直到看清为止？观察完毕,要立即擦净镜头？方法是:镜头远离玻片,用擦镜纸拭去镜头上的香柏油,再用擦镜纸蘸少许二甲苯擦去镜头上残留油迹,*后用干净的擦镜纸擦去残留的二甲苯？ (6)使用和保存显微镜的注意事项 1)显微镜是精密仪器,使用时必须严格按照操作规程进行操作？ 2)取显微镜时,要平拿轻放,一手握住镜臂,一手托住镜座,使显微镜直立于胸前,不得倾斜,以防目镜从镜筒上端滑出？ 3)观察时,不要随意移动显微镜的位置,观察任何物体都必须先用低倍镜,再用高倍镜,观察时必须两眼都睁开,以免疲劳,且左眼窥镜,右眼观察绘图？ 4)由低倍镜转换高倍镜时,不要直接扳动物镜,而要转动物镜转换器进行转换,以防物镜脱落？ 5)临时装片上的标本要加盖玻片,必须两面擦干之后方可放置于载物台上观察,并且不可使用倾斜关节,以免水液流出污染镜体？ 6)不要随意转动调焦螺旋,使用细调焦螺旋时用力要轻,转动要慢,如果转不动,一定不要硬转,以免磨损齿轮？ 7)如发现机件使用不灵,不要用力转动或私自拆修,应立即报告指导教师以及时排除故障？ 8)用完显微镜后,要移去载玻片,用纱布擦拭机械部分？光学部分如有灰尘污垢,必须先用镜头毛刷拂去或用吹风球吹去,再用擦镜纸轻轻擦拭,千万不要用手指或纱布擦抹光学部分？然后转开物镜呈八字形,恢复原状？ 3.人口腔上皮细胞的观察 (1)人口腔上皮细胞临时装片的制备:清水漱口后,用牙签的粗端轻轻地在口腔颊部刮几下(注意不要用力过猛,以免损伤颊部)？将刮下的白色黏性物薄而均匀地涂在干燥洁净的载玻片上(载玻片必须在制作前用清水和乙醇溶液清洗),加一滴0.9%NaCl溶液,不宜过多,恰好在盖玻片之下为宜,然后加盖玻片(可用吸水纸吸去多余水分,注意盖玻片的盖片方法),在低倍显微镜下观察？ (2)显微观察:人口腔上皮细胞临时装片首先在低倍镜下观察,口腔上皮细胞常多个连在一起？由于上皮细胞薄而透明,光线需要暗些？找到口腔上皮细胞后,将其放在视野中心,再转换高倍镜观察？口腔上皮细胞呈扁平多边形？试辨认细胞核？细胞质？细胞膜？若观察不清楚时,可在盖玻片一侧加一滴0.1%亚甲蓝,另一侧放一小块吸水纸？如此,可使染液流入盖玻片下面,将细胞染成浅蓝色,核染色较深？注意染液不可加得过多,以免妨碍观察？ 【实验报告】 1.显微镜使用的注意事项有哪些? 2.绘制人口腔上皮细胞图(绘2~3个细胞,详绘其中1个细胞)？ 实验2动物的四大类基本组织 观察和了解动物组织的基本类型？结构和功能,是动物学学习和研究中显微结构观察的基础？该实验可进一步训练动物组织临时装片的制备技术和显微镜的使用技能？ 【目的要求】 1.学习动物组织的临时制片方法？ 2.了解动物组织类型的多样性及其与功能多样性的关系？ 3.掌握动物四大类基本组织的基本结构？ 【材料与用品】 1.材料 活蛙或蟾蜍？蝗虫浸制标本？蛙肠系膜装片(镀银法,苏木精复染)？食道横切片？疏松结缔组织装片？兔肌腱纵切片？各类脊椎动物代表动物血涂片装片？透明软骨染色切片？猫胃的横切片？平滑肌分离装片？心肌切片？兔脊髓横切片？牛脊髓涂片？ 2.用具和药品 显微镜？载玻片？盖玻片？解剖器？吸管？吸水纸？牙签？0.1%及1%亚甲蓝？0.7%及09%NaCl溶液？蒸馏水等？ 【实验步骤】 1.上皮组织 (1)单层扁平上皮:将蛙肠系膜装片置于低倍镜下,选择标本*薄的部分观察,在黄色或淡黄色的背景下,显现出黑棕色或黑色的波形线,这是细胞之间的边界？用高倍镜观察,可以看到细胞为多边形,细胞边缘呈锯齿状,相邻细胞彼此镶嵌,在每个细胞中都可看到一个染成淡蓝色的椭圆形的细胞核？ (2)复层扁平上皮:取食道横切片,先用低倍镜找到上皮,转高倍镜观察？上皮的基层为排列整齐的一层柱状细胞,*外层为多层扁平细胞？ 2.结缔组织 (1)疏松结缔组织:取活蛙或蟾蜍经麻醉或处死后,剪开腹部的皮肤,用细镊子从皮肤与肌肉层之间取下一小片结缔组织(两栖类的皮下结缔组织不发达)？放在干净的载玻片上,加一滴0.7%NaCl溶液？用解剖针将其展薄,加数滴1%亚甲蓝？2min后,用07%NaCl溶液冲去多余染液,加盖玻片在镜下观察？也可直接观察疏松结缔组织永jiu装片？可见胶原纤维和弹性纤维均不着色？胶原纤维成束,弯曲成波浪状;弹性纤维细而具分支,不成束,无波浪状弯曲？结缔组织细胞不甚规则,细胞核着色深而清楚,细胞质色浅能辨认出细胞界限？ (2)致密结缔组织:观察兔肌腱纵切片,肌腱中的胶原纤维成束密集平行排列,成纤维细胞成行平行排列在纤维束中？高倍镜下,成纤维细胞呈长梭形,其长杆状细胞核着色深(肌腱的功能是什么?疏松和致密两种结缔组织在结构？分布和功能上有何差异?)？ (3)血液组织:解剖蛙或蟾蜍,用吸管从心脏(*好在动脉圆锥处)取出血液,放一小器皿中,加入少许0.7%NaCl溶液稀释？吸此液一滴,制成临时装片,在镜下观察？蛙的红细胞呈扁椭圆形,单个红细胞呈极浅的黄色,中央有一较大的椭圆形细胞核？红细胞间的无色液体称为血浆(实际已被稀释)(血液为何呈红色?有何功能?)？观察爬行类？鸟类和哺乳类代表动物的血涂片装片,比较不同类群血液组织的差异,注意人或兔等哺乳动物成熟的红细胞无细胞核(哺乳动物红细胞无核可说明哪些问题?)？ (4)软骨组织:观察透明软骨的染色切片,可见大部分底质被染成相同的均匀颜色,此即为软骨基质,基质中有许多圆形或卵圆形的窝,称为胞窝,常2个或4个并列在一起,胞窝内有软骨细胞,细胞核染成深色,细胞膜界限很清晰,细胞质染色极浅,不太清楚？ 3.肌肉组织 (1)横纹肌:从蝗虫浸制标本胸部用镊子取下一小束肌肉,放在载玻片上,加1~2滴水,用解剖针仔细分离(越细越好),加盖玻片置于镜下观察？蝗虫的肌肉为横纹肌,肌肉组织由长形的肌纤维组成？外面有一层薄膜叫肌膜？细胞中与其长轴平行排列着许多细丝状物,此为肌原纤维？肌原纤维有明暗相间的横纹(为什么?),可在高倍镜下详细观察？在细胞膜下面分布有许多椭圆形的细胞核,故横纹肌为多核的合胞体？若观察不够清楚时,可用0.1%亚甲蓝染色？ (2)平滑肌:取猫胃的横切片,在低倍镜下观察,肠壁被染成粉红色的部分为肌肉层,将光线调节得略暗些,可见肌肉由很多细梭形的细胞所组成,此即为平滑肌细胞(能否看到横纹?),细胞核呈椭圆形,被染成蓝紫色？也可直接观察平滑肌分离装片？ (3)心肌:低倍镜下观察心肌切片,同一张切片上常可看到各种不同的心肌切面(为何有此现象?)？选择典型的纵切面的部分,换高倍镜观察？心肌细胞为短柱状？有分支,各心肌细胞以分支相连成网,一个线心肌细胞一般有1个核位于细胞的中心部分？观察心肌细胞的横纹(与骨骼肌细胞的比较有何差异?)？高倍镜下可见横过心肌纤维的染色深的短线条为闰盘,是两心肌细胞的连接面(闰盘的作用有何特殊性?与心脏所担负功能的特点有何联系?)？