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书名:分子生物学实验
ISBN:9787308122849
作者:吴建祥
内容提要:
该书包括如下内容:质粒DNA分离纯化的原理和操作技能; DNA琼脂糖凝胶电泳的基本原理和操作步骤; DNA限制性内切酶的作用原理和DNA酶切的操作技能; DNA割胶回收、纯化的基本原理和操作步骤; T4 DNA 连接酶的作用机理以及DNA 连接的操作方法;感受态细胞的概念、感受态细胞制备和质粒转化的操作步骤; PCR 的基本原理和操作技能;动植物组织DNA的提取的基本原理和操作步骤;动植物组织总RNA提取的基本原理和操作步骤; RT-PCR的基本原理和操作技能;Southern blot、Northern blot、SDS-PAGE、 Western blot的原理和操作步骤;基因的原核表达等内容。
作者简介:
一直从事分子生物学的研究及分子生物学课程教育,专业是病毒分子生物学专业。
目录:
diyi章 质粒DNA的分离、纯化和鉴定
diyi节 概述
第二节 碱法提纯质粒DNA
一、设备
二、材料
三、试剂
四、操作步骤
五、注意事项
第三节 Axygen质粒提取试剂盒提纯质粒DNA
一、设备
二、材料
三、试剂
四、操作步骤
五、注意事项
第四节 离心机的使用及注意事项
一、离心机的使用步骤
二、离心机使用的注意事项
第二章 DNA琼脂糖凝胶电泳和RNA甲醛琼脂糖凝胶变性电泳
diyi节 概述
第二节 DNA的琼脂糖凝胶
一、设备
二、材料
三、试剂
四、操作步骤
五、注意事项
第三节 RNA甲醛琼脂糖凝胶变性电泳
一、设备
二、材料
三、试剂
四、操作步骤
五、注意事项
第三章 质粒DNA的限制性酶切鉴定、割胶回收与纯化
diyi节 概述
第二节 设备、材料及试剂
一、设备
二、材料
三、试剂
第三节 操作步骤
一、酶切反应
二、酶切产物的电泳分离和鉴定
三、酶切产物的割胶回收
四、注意事项
第四章 特异片段与载体的连接反应
diyi节 概述
一、带有非互补粘性末端DNA片段的连接
二、带有相同粘性末端DNA片段的连接
三、带有平末端DNA片段的连接
四、适当改造的DNA片段的连接
五、PCR介导的DNA片段的连接
第二节 设备、材料及试剂
一、设备
二、材料
三、试剂
第三节 操作步骤
一、外源片段和pMDl8-T载体的连接反应(10μl体系)
二、外源片段和质粒载体的连接反应(10μl体系)
三、注意事项
第五章 大肠杆菌感受态细胞的制备及连接产物的转化、鉴定
diyi节 概述
一、大肠杆菌感受态绀胞的制备
二、影响细菌转化效率的因素
三、转化子的鉴定
第二节 设备、材料及试剂
一、设备
二、材料
……
第六章 PCR扩增技术
第七章 基因组DNA的提取
第八章 动植物总RNA的提取
第九章 RT-PCR技术
第十章 蛋白质的SDS-PAGE电泳及Western blot分析
第十一章 核酸分子杂交技术
第十二章 RFLP和RAPD技术
第十三章 蛋白的原核表达技术
第十四章 酶联免疫吸附试验
附录
参考文献
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