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书名:组织学与胚胎学图解实验与实训指导
定价:59.8
ISBN:9787030559517
作者:无
版次:1
出版时间:2018-02
内容提要:
本教材根据本科教学大纲的要求编写,并进行了较大改革。全书共二十项实验,分为图解实验指导和实训练习两部分。
图解实验指导主要特色是打破了常规的实验教材编写形式,把改革核心放在“图解”之上,使学生在领悟“图解”内容的基础上再进行实训练习;实训练习对实验报告进行全面改革,将过去单一的绘图练习改变为生动活泼、形式多样的图学实训,既结合镜下观察进行填图、填空、选择连线等多项训练。把理论知识和实验技能结合起来,使学生深入地掌握组织学与胚胎学的基本内容,达到融会贯通和触类旁通的目的,提高学生分析问题与解决问题的能力。
目录:
目录
实验一 普通生物显微镜的构造、使用和维护实验 1
一、实验室规则 1
二、普通生物显微镜的构造、使用和维护 1
三、石蜡切片标本的制作 4
四、观察切片应注意的问题 5
普通生物显微镜的构造、使用和维护实训练习 6
实验二 上皮组织实验 8
一、单层扁平上皮 8
二、单层柱状上皮 10
三、单层立方上皮 11
四、假复层纤毛柱状上皮 11
五、复层扁平上皮 12
六、变移上皮 13
上皮组织实训练习 14
实验三 固有结缔组织实验 17
一、疏松结缔组织(铺片) 17
二、疏松结缔组织(切片) 18
三、致密结缔组织 18
四、脂肪组织 19
五、肥大细胞 19
六、浆细胞 20
固有结缔组织实训练习 21
实验四 血液实验 25
一、油镜的使用 25
二、血涂片制作与光镜观察 25
三、红细胞 26
四、中性粒细胞 27
五、嗜酸粒细胞 27
六、嗜碱粒细胞 28
七、淋巴细胞 28
八、单核细胞 29
九、血小板 29
血液实训练习 30
实验五 软骨和骨实验 32
一、透明软骨 32
二、弹性软骨 33
三、纤维软骨 34
四、骨组织 34
五、骨发生 35
软骨和骨实训练习 37
实验六 肌组织实验 39
一、骨骼肌 39
二、心肌 40
三、平滑肌 41
肌组织实训练习 43
实验七 神经组织实验 48
一、脊髓前角多极神经元 48
二、突触 49
三、有髓神经纤维和神经 50
四、触觉小体与环层小体 51
五、运动终板 52
神经组织实训练习 53
实验八 神经系统实验 58
一、大脑 58
二、小脑 59
三、脊神经节 59
四、大脑锥体细胞 60
五、小脑浦肯野细胞 61
神经系统实训练习 62
实验九 眼和耳实验 64
一、眼球 64
二、内耳 67
三、壶腹嵴 68
四、位觉斑(椭圆囊斑和球囊斑) 69
眼和耳实训练习 70
实验十 循环系统实验 72
一、中动脉与中静脉 72
二、大动脉 73
三、小动脉与小静脉 74
四、心脏 75
五、毛细血管 77
六、微动脉与微静脉 78
循环系统实训练习 79
实验十一 皮肤实验 83
一、掌皮 83
二、头皮 85
三、体皮 86
皮肤实训练习 87
实验十二 免疫系统实验 90
一、淋巴结 90
二、脾脏 92
三、胸腺 94
免疫系统实训练习 96
实验十三 内分泌系统实验 100
一、甲状腺 100
二、甲状旁腺 101
三、肾上腺 102
四、脑垂体 103
内分泌系统实训练习 105
实验十四 消化管实验 110
一、食管 110
二、胃底 111
三、十二指肠 113
四、空肠 116
五、回肠 117
六、结肠 117
七、阑尾 117
八、小肠 118
消化管实训练习 119
实验十五 消化腺实验 123
一、腮腺 123
二、颌下腺 124
三、肝脏 125
四、胰腺 128
五、胰岛 130
六、胆囊 131
消化腺实训练习 132
实验十六 呼吸系统实验 136
一、嗅黏膜 136
二、气管 136
三、肺 138
呼吸系统实训练习 141
实验十七 泌尿系统实验 146
一、肾 146
二、膀胱 148
三、输尿管 149
泌尿系统实训练习 150
实验十八 男性生殖系统实验 154
一、睾丸 154
二、附睾 156
三、前列腺 158
四、输精管 159
男性生殖系统实训练习 160
实验十九 女性生殖系统实验 164
一、卵巢 164
二、黄体 168
三、输卵管 168
四、子宫(增生期) 169
五、子宫分泌期 170
六、静止期乳腺 171
七、分泌期乳腺 172
女性生殖系统实训练习 173
实验二十 人体胚胎早期发育实验 180
人体胚胎早期发育实训练习 183
在线试读:
实验一 普通生物显微镜的构造、使用和维护实验
【学习目标】
1. 能正确识别普通生物显微镜的结构、各部件的名称及功能。
2. 熟练地操作普通生物显微镜。
3. 掌握普通生物显微镜的维护。
【实验内容】
一、实验室规则
1. 实验前必须复习理论课内容,做好每次实验课的预习,了解本次实验的目的和内容。
2. 实验课应带教科书、本册教辅书(《组织学与胚胎学图解实验与实验指导》)、绘图铅笔(普通HB 铅笔和红蓝铅笔)、橡皮和尺子等。
3. 穿好工作服,提前10 分钟到达实验室,不得迟到早退,不得随意离开实验室。
4. 关闭任何通信工具。
5. 按指定编号使用普通生物显微镜,不得擅自拆卸和更换显微镜的部件;实验课完毕,将切片按号码插入切片盒,并把普通生物显微镜和切片盒放回原处。
6. 认真做好每次实验报告,并按时交老师批改。
7. 值日生负责打扫卫生,关好水、电与门窗。
二、普通生物显微镜的构造、使用和维护
1. 普通生物显微镜的构造 普通生物显微镜(图1-1)主要由机械系统和光学系统两部分装置组成。
图1-1 普通生物显微镜
1. 目镜 2. 物镜转换器 3. 物镜 4. 切片夹 5. 推片器 6. 载物台 7. 聚光器 8. 虹彩光圈 9. 平台移动旋钮 10. 触摸式微调手轮 11. 随机定位装置 12. 镜座 13. 光源调节旋钮 14. 镜臂 15. 粗调节旋钮 16. 细调节旋钮 17. 细调节旋钮 18. 聚光器旋钮
(1)机械系统装置
1)镜座:在*下部,起支持作用。
2)镜臂:呈弓形,作支持和握取之用。
3)物镜旋转盘:上接镜筒,下嵌接物镜,可通过其旋转更换物镜。
4)载物台:放置切片的平台,中央有圆孔。载物台上有推进器和切片夹。
5)粗调节旋钮:用于低倍镜焦距的调节。
6)细调节旋钮:用于高倍镜焦距的调节。
(2)光学系统装置
1)目镜:可分5×、7×、10×、15×。
2)物镜:可分低倍镜(10×)、高倍镜(40×)、油镜(100×)(显微镜放大倍数= 目镜放大倍数× 物镜放大倍数)。
3)聚光器:位于载物台下,可上下移动。内装虹彩光圈,可开大和缩小。
4)反光镜:位于镜座上,通过其旋转,可将光线集中至聚光器。反光镜有平、凹两面,平面镜反射光弱,可用于强光源;凹面镜反射光强,用于弱光源。若显微镜使用灯光照明系统,则不用反光镜。
2. 普通生物显微镜的使用
(1)准备:一手握持显微镜的镜臂,另一手托住镜座,将其放置于桌面。显微镜距桌沿的距离不得少于10cm。课间休息离开座位时,应将显微镜移向桌面中央,以免碰落损坏(图1-2)。
(2)对光:上升聚光器,放大虹彩光圈。转动物镜旋转盘,将低倍物镜对正载物台的圆孔,转动粗调节旋钮使载物台距物镜约5mm。用左眼从目镜观察,同时转动反光镜对向光源进行采光,至整个视野达到均匀而明亮的圆形白色光区为止。注意勿采日光的直射光线(图1-2)。
(3)装片:将组织切片装入载物台的切片夹内(注意盖玻片向上),用推进器将切片推至物镜下(图1-3)。
图1-2 普通生物显微镜的使用——准备、对光
图1-3 普通生物显微镜的使用——装片
(4)观察方法:使用双目显微镜,应左右眼同时观察,书写或绘图时,将双眼移开;使用单目显微镜,则用左眼观察,以左手操纵粗、细调节旋钮,以右手书写或绘图(图1-4)。
(5)低倍镜观察:从侧面观察低倍镜头,旋转粗调节旋钮使镜头接近切片为止(注意镜头不能接触切片)。从目镜观察,慢慢转动粗调节旋钮,使载物台下降至物像清楚为止,同时旋转细调节旋钮,边旋转边观察,直到视野物像清晰为止(图1-5)。
图1-4 普通生物显微镜使用——观察方法
图1-5 普通生物显微镜的使用——低倍镜观察
(6)高倍镜观察:需转换高倍镜时,必须先在低倍镜下将要观察的部分移到视野正中,然后直接转换高倍镜头(图1-6)。此时,镜下物像隐约可见,再稍微转动细调节旋钮即可看清物像。
(7)油镜观察:需用油镜观察时,先用高倍镜作初步观察后,降下载物台,在切片上滴上微量香柏油,再将油镜下降接近切片并浸泡于油内。用微调节对好焦,移动推进器搜寻切片中的组织细胞结构。观察完毕后,须用擦镜纸沾少许二甲苯将物镜及切片上的油拭去,再用干净擦镜纸轻轻拭抹镜头。
(8)显微镜恢复零位:实验完毕,取下切片,并将其放回切片盒内;反光镜镜面呈左右方向竖立,将物镜转成“八”字形,下降载物台至*低位置,关闭虹彩光圈,关掉光源(图1-7),盖上镜罩,填写好使用卡。
图1-6 普通生物显微镜的使用——高倍镜观察
图1-7 普通生物显微镜的使用——恢复零位
3. 光学显微镜的保护
(1)搬动显微镜要轻拿轻放,使用显微镜要严格遵守操作规程。
(2)显微镜必须经常保持清洁。机械部分可用纱布或绸布擦净,光学部分(反光镜除外)只能用擦镜纸轻轻试擦,严禁用手或其他物品擦拭,以防污损。
(3)油镜使用后,应立即用擦镜纸沾少量二甲苯将镜头擦净。
(4)显微镜部件不得拆卸或互相调换,若有故障,应立即报告老师进行处理,不得自行修理。
(5)显微镜用毕,应将物镜转离载物台中央的圆孔,并下降载物台,放回原处。
(6)打扫实验室卫生前,必须将显微镜放入柜中,以免灰尘沾污。
三、石蜡切片标本的制作
1. 取材和固定 根据需要取出人或动物的新鲜组织,其大小为0.5 ~ 1.0cm3,并立即投入固定液体中固定6 ~ 24 小时。固定的主要目的是使组织内的蛋白质凝固,以保持原来的形态结构。常用的固定液有以下几种:① 10% 中性福尔马林(Formalin);② Susa 液;③ Zenker’s 液;④ Heller’s 液;⑤ Bouin’s 液。
2. 脱水和包埋 普通固定液多是水溶液,必须先脱去组织内的水分,为浸蜡创造条件。脱水剂通常是乙醇,将组织块从低浓度的乙醇移至高浓度的乙醇,去净组织内的水分。然后用二甲苯替代乙醇,组织块浸入二甲苯后逐渐变得透明。再将组织块置入溶解的石蜡液中,使石蜡浸入组织并替换出二甲苯。*后将组织块包埋于石蜡内,使组织产生一定的硬度,便于切片。
3. 切片 将蜡块粘于木块上,用切片机切成5 ~ 6μm 厚的薄片。把切下的薄片贴附于有蛋白甘油的载玻片上,置温箱中烤干。
4. 染色 染色的目的是使组织内不同结构染上不同的颜色,以利于显微镜观察。染色的方法很多,根据观察与研究目的不同而选用。组织学和病理学教学标本*常用的是苏木精(hematoxylin)和伊红(eosin)染色法,简称HE 染色。
苏木精的水溶液显碱性,可将组织中的酸性物质染成蓝色,如细胞核内的染色质、细胞质内的核糖体、软骨的基质和黏液等。伊红的水溶液显酸性,可将组织中的碱性物质染成红色,如细胞质的普通蛋白质、核仁和胶原纤维等。
染色的步骤是将切片放入二甲苯中使石蜡脱净,然后经乙醇(高浓度至低浓度)入水,再用苏木精和伊红分别染色。
5. 组织切片的染色法 常用的HE 染色法只能显示组织的一般结构,不能显示组织的所有结构。某些结构或成分需用特殊染色法或组织化学方法等才能显示,如网状纤维、嗜银细胞、网织红细胞、线粒体等。
6. 脱水和封固 染色后的切片经乙醇(由低浓度至高浓度)脱水,二甲苯透明后,再在切片上滴加适量树胶,将盖玻片放在树胶上,待干后即可观察和长期保存。
四、观察切片应注意的问题
1. 全面而系统地观察切片 先用肉眼观察切片标本,熟悉标本的大体形态,寻找要观察的大致部位。然后用低倍镜观察标本的全貌、结构层次或组织分布,并选择典型结构,再转高倍镜进一步观察。
2. 建立组织与器官的立体结构图像 一种组织或器官,通过不同部位和方向的切面,所显示的形态和结构通常不完全相同。因此,一般要求观察组织或器官的纵切面与横切面,并尽可能观察不同部位的切面,不要看到一种切面就了事。然后将不同切面的形态特点加以分析与综合,获得一个完整的立体结构图像。
3. 善用比较、分析与综合的方法,提高辨认能力 在组织标本中,有些细胞、组织和器官的形态类似,如中性粒细胞与嗜酸粒细胞,复层扁平上皮与变移上皮,致密结缔组织与平滑肌组织,骨骼肌与心肌组织,淋巴结与脾脏,小肠与结肠,腮腺、颌下腺与胰腺,甲状腺与哺乳期乳腺,子宫增生期与分泌期等。应对其进行比较,经过综合分析,抓住各自的结构特点,从而达到区分不同结构的目的。
4. 理论与实践相联系 有时切片所见与理论描述不完全一致,可能是组织或器官所处的生理状况不同所致,如甲状腺功能亢进时的滤泡细胞呈柱状,而功能低下时则呈扁平形;不同的物种组织结构也不尽相同,如猪的肝小叶边界较人的清楚,狗、猫的小肠腺潘氏细胞甚少或没有,甲状旁腺无嗜酸性细胞,兔、猫卵巢的间质腺较人的发达等;固定剂可致使组织结构发生改变,福尔马林可导致组织膨胀,乙醇可导致组织收缩;取材不及时或组织有病变,则细胞发生肿胀、核固缩,胞质显空泡,甚至有寄生虫等;切片刀有缺口,则造成组织发生纵行裂痕;浸蜡时间过长,则组织脆硬,易产生不规则裂纹;贴片时未充分展开,则组织重叠形成深染的条索状结构。因此,当标本出现与理论描述的形态不同时,应认真思考。
普通生物显微镜的构造、使用和维护实训练习
年 月 日 第 周 星期 总分
一、看图填空(50 分)
a.
b.
c.
d.
e.
f.
g.
h.
i.
j.
图1-01 双目生物光学显微镜
二、跟我学(50 分)
1. 组织制片技术包括和两个基本过程。
2. 组织切片染色的方法较多,*常用的方法为和染色法,简称HE染色法。另外,组织细胞成分被苏木素染成蓝色,称为性;组织细胞成分被伊红染成红色,称为性;组织结构对苏木素和伊红均有一定的亲和力,称为性;用碱性甲苯胺蓝进行染色时,被染成红色,而不染成蓝色,这种色变现象称为性;将组织块置于硝酸银溶液中,细胞将硝酸银还原成银颗粒,在细胞内形成黑色或棕黄色沉积,这一染色特性称为性;若细胞对硝酸银无直接还原能力,需经还原剂处理,产生沉淀而显色,这一染色特性称为性。
3. 根据上述染色的特性,你能区分下列图片中的几种染色特性吗?请用线条将图片与文字连接起来。
定价:59.8
ISBN:9787030559517
作者:无
版次:1
出版时间:2018-02
内容提要:
本教材根据本科教学大纲的要求编写,并进行了较大改革。全书共二十项实验,分为图解实验指导和实训练习两部分。
图解实验指导主要特色是打破了常规的实验教材编写形式,把改革核心放在“图解”之上,使学生在领悟“图解”内容的基础上再进行实训练习;实训练习对实验报告进行全面改革,将过去单一的绘图练习改变为生动活泼、形式多样的图学实训,既结合镜下观察进行填图、填空、选择连线等多项训练。把理论知识和实验技能结合起来,使学生深入地掌握组织学与胚胎学的基本内容,达到融会贯通和触类旁通的目的,提高学生分析问题与解决问题的能力。
目录:
目录
实验一 普通生物显微镜的构造、使用和维护实验 1
一、实验室规则 1
二、普通生物显微镜的构造、使用和维护 1
三、石蜡切片标本的制作 4
四、观察切片应注意的问题 5
普通生物显微镜的构造、使用和维护实训练习 6
实验二 上皮组织实验 8
一、单层扁平上皮 8
二、单层柱状上皮 10
三、单层立方上皮 11
四、假复层纤毛柱状上皮 11
五、复层扁平上皮 12
六、变移上皮 13
上皮组织实训练习 14
实验三 固有结缔组织实验 17
一、疏松结缔组织(铺片) 17
二、疏松结缔组织(切片) 18
三、致密结缔组织 18
四、脂肪组织 19
五、肥大细胞 19
六、浆细胞 20
固有结缔组织实训练习 21
实验四 血液实验 25
一、油镜的使用 25
二、血涂片制作与光镜观察 25
三、红细胞 26
四、中性粒细胞 27
五、嗜酸粒细胞 27
六、嗜碱粒细胞 28
七、淋巴细胞 28
八、单核细胞 29
九、血小板 29
血液实训练习 30
实验五 软骨和骨实验 32
一、透明软骨 32
二、弹性软骨 33
三、纤维软骨 34
四、骨组织 34
五、骨发生 35
软骨和骨实训练习 37
实验六 肌组织实验 39
一、骨骼肌 39
二、心肌 40
三、平滑肌 41
肌组织实训练习 43
实验七 神经组织实验 48
一、脊髓前角多极神经元 48
二、突触 49
三、有髓神经纤维和神经 50
四、触觉小体与环层小体 51
五、运动终板 52
神经组织实训练习 53
实验八 神经系统实验 58
一、大脑 58
二、小脑 59
三、脊神经节 59
四、大脑锥体细胞 60
五、小脑浦肯野细胞 61
神经系统实训练习 62
实验九 眼和耳实验 64
一、眼球 64
二、内耳 67
三、壶腹嵴 68
四、位觉斑(椭圆囊斑和球囊斑) 69
眼和耳实训练习 70
实验十 循环系统实验 72
一、中动脉与中静脉 72
二、大动脉 73
三、小动脉与小静脉 74
四、心脏 75
五、毛细血管 77
六、微动脉与微静脉 78
循环系统实训练习 79
实验十一 皮肤实验 83
一、掌皮 83
二、头皮 85
三、体皮 86
皮肤实训练习 87
实验十二 免疫系统实验 90
一、淋巴结 90
二、脾脏 92
三、胸腺 94
免疫系统实训练习 96
实验十三 内分泌系统实验 100
一、甲状腺 100
二、甲状旁腺 101
三、肾上腺 102
四、脑垂体 103
内分泌系统实训练习 105
实验十四 消化管实验 110
一、食管 110
二、胃底 111
三、十二指肠 113
四、空肠 116
五、回肠 117
六、结肠 117
七、阑尾 117
八、小肠 118
消化管实训练习 119
实验十五 消化腺实验 123
一、腮腺 123
二、颌下腺 124
三、肝脏 125
四、胰腺 128
五、胰岛 130
六、胆囊 131
消化腺实训练习 132
实验十六 呼吸系统实验 136
一、嗅黏膜 136
二、气管 136
三、肺 138
呼吸系统实训练习 141
实验十七 泌尿系统实验 146
一、肾 146
二、膀胱 148
三、输尿管 149
泌尿系统实训练习 150
实验十八 男性生殖系统实验 154
一、睾丸 154
二、附睾 156
三、前列腺 158
四、输精管 159
男性生殖系统实训练习 160
实验十九 女性生殖系统实验 164
一、卵巢 164
二、黄体 168
三、输卵管 168
四、子宫(增生期) 169
五、子宫分泌期 170
六、静止期乳腺 171
七、分泌期乳腺 172
女性生殖系统实训练习 173
实验二十 人体胚胎早期发育实验 180
人体胚胎早期发育实训练习 183
在线试读:
实验一 普通生物显微镜的构造、使用和维护实验
【学习目标】
1. 能正确识别普通生物显微镜的结构、各部件的名称及功能。
2. 熟练地操作普通生物显微镜。
3. 掌握普通生物显微镜的维护。
【实验内容】
一、实验室规则
1. 实验前必须复习理论课内容,做好每次实验课的预习,了解本次实验的目的和内容。
2. 实验课应带教科书、本册教辅书(《组织学与胚胎学图解实验与实验指导》)、绘图铅笔(普通HB 铅笔和红蓝铅笔)、橡皮和尺子等。
3. 穿好工作服,提前10 分钟到达实验室,不得迟到早退,不得随意离开实验室。
4. 关闭任何通信工具。
5. 按指定编号使用普通生物显微镜,不得擅自拆卸和更换显微镜的部件;实验课完毕,将切片按号码插入切片盒,并把普通生物显微镜和切片盒放回原处。
6. 认真做好每次实验报告,并按时交老师批改。
7. 值日生负责打扫卫生,关好水、电与门窗。
二、普通生物显微镜的构造、使用和维护
1. 普通生物显微镜的构造 普通生物显微镜(图1-1)主要由机械系统和光学系统两部分装置组成。
图1-1 普通生物显微镜
1. 目镜 2. 物镜转换器 3. 物镜 4. 切片夹 5. 推片器 6. 载物台 7. 聚光器 8. 虹彩光圈 9. 平台移动旋钮 10. 触摸式微调手轮 11. 随机定位装置 12. 镜座 13. 光源调节旋钮 14. 镜臂 15. 粗调节旋钮 16. 细调节旋钮 17. 细调节旋钮 18. 聚光器旋钮
(1)机械系统装置
1)镜座:在*下部,起支持作用。
2)镜臂:呈弓形,作支持和握取之用。
3)物镜旋转盘:上接镜筒,下嵌接物镜,可通过其旋转更换物镜。
4)载物台:放置切片的平台,中央有圆孔。载物台上有推进器和切片夹。
5)粗调节旋钮:用于低倍镜焦距的调节。
6)细调节旋钮:用于高倍镜焦距的调节。
(2)光学系统装置
1)目镜:可分5×、7×、10×、15×。
2)物镜:可分低倍镜(10×)、高倍镜(40×)、油镜(100×)(显微镜放大倍数= 目镜放大倍数× 物镜放大倍数)。
3)聚光器:位于载物台下,可上下移动。内装虹彩光圈,可开大和缩小。
4)反光镜:位于镜座上,通过其旋转,可将光线集中至聚光器。反光镜有平、凹两面,平面镜反射光弱,可用于强光源;凹面镜反射光强,用于弱光源。若显微镜使用灯光照明系统,则不用反光镜。
2. 普通生物显微镜的使用
(1)准备:一手握持显微镜的镜臂,另一手托住镜座,将其放置于桌面。显微镜距桌沿的距离不得少于10cm。课间休息离开座位时,应将显微镜移向桌面中央,以免碰落损坏(图1-2)。
(2)对光:上升聚光器,放大虹彩光圈。转动物镜旋转盘,将低倍物镜对正载物台的圆孔,转动粗调节旋钮使载物台距物镜约5mm。用左眼从目镜观察,同时转动反光镜对向光源进行采光,至整个视野达到均匀而明亮的圆形白色光区为止。注意勿采日光的直射光线(图1-2)。
(3)装片:将组织切片装入载物台的切片夹内(注意盖玻片向上),用推进器将切片推至物镜下(图1-3)。
图1-2 普通生物显微镜的使用——准备、对光
图1-3 普通生物显微镜的使用——装片
(4)观察方法:使用双目显微镜,应左右眼同时观察,书写或绘图时,将双眼移开;使用单目显微镜,则用左眼观察,以左手操纵粗、细调节旋钮,以右手书写或绘图(图1-4)。
(5)低倍镜观察:从侧面观察低倍镜头,旋转粗调节旋钮使镜头接近切片为止(注意镜头不能接触切片)。从目镜观察,慢慢转动粗调节旋钮,使载物台下降至物像清楚为止,同时旋转细调节旋钮,边旋转边观察,直到视野物像清晰为止(图1-5)。
图1-4 普通生物显微镜使用——观察方法
图1-5 普通生物显微镜的使用——低倍镜观察
(6)高倍镜观察:需转换高倍镜时,必须先在低倍镜下将要观察的部分移到视野正中,然后直接转换高倍镜头(图1-6)。此时,镜下物像隐约可见,再稍微转动细调节旋钮即可看清物像。
(7)油镜观察:需用油镜观察时,先用高倍镜作初步观察后,降下载物台,在切片上滴上微量香柏油,再将油镜下降接近切片并浸泡于油内。用微调节对好焦,移动推进器搜寻切片中的组织细胞结构。观察完毕后,须用擦镜纸沾少许二甲苯将物镜及切片上的油拭去,再用干净擦镜纸轻轻拭抹镜头。
(8)显微镜恢复零位:实验完毕,取下切片,并将其放回切片盒内;反光镜镜面呈左右方向竖立,将物镜转成“八”字形,下降载物台至*低位置,关闭虹彩光圈,关掉光源(图1-7),盖上镜罩,填写好使用卡。
图1-6 普通生物显微镜的使用——高倍镜观察
图1-7 普通生物显微镜的使用——恢复零位
3. 光学显微镜的保护
(1)搬动显微镜要轻拿轻放,使用显微镜要严格遵守操作规程。
(2)显微镜必须经常保持清洁。机械部分可用纱布或绸布擦净,光学部分(反光镜除外)只能用擦镜纸轻轻试擦,严禁用手或其他物品擦拭,以防污损。
(3)油镜使用后,应立即用擦镜纸沾少量二甲苯将镜头擦净。
(4)显微镜部件不得拆卸或互相调换,若有故障,应立即报告老师进行处理,不得自行修理。
(5)显微镜用毕,应将物镜转离载物台中央的圆孔,并下降载物台,放回原处。
(6)打扫实验室卫生前,必须将显微镜放入柜中,以免灰尘沾污。
三、石蜡切片标本的制作
1. 取材和固定 根据需要取出人或动物的新鲜组织,其大小为0.5 ~ 1.0cm3,并立即投入固定液体中固定6 ~ 24 小时。固定的主要目的是使组织内的蛋白质凝固,以保持原来的形态结构。常用的固定液有以下几种:① 10% 中性福尔马林(Formalin);② Susa 液;③ Zenker’s 液;④ Heller’s 液;⑤ Bouin’s 液。
2. 脱水和包埋 普通固定液多是水溶液,必须先脱去组织内的水分,为浸蜡创造条件。脱水剂通常是乙醇,将组织块从低浓度的乙醇移至高浓度的乙醇,去净组织内的水分。然后用二甲苯替代乙醇,组织块浸入二甲苯后逐渐变得透明。再将组织块置入溶解的石蜡液中,使石蜡浸入组织并替换出二甲苯。*后将组织块包埋于石蜡内,使组织产生一定的硬度,便于切片。
3. 切片 将蜡块粘于木块上,用切片机切成5 ~ 6μm 厚的薄片。把切下的薄片贴附于有蛋白甘油的载玻片上,置温箱中烤干。
4. 染色 染色的目的是使组织内不同结构染上不同的颜色,以利于显微镜观察。染色的方法很多,根据观察与研究目的不同而选用。组织学和病理学教学标本*常用的是苏木精(hematoxylin)和伊红(eosin)染色法,简称HE 染色。
苏木精的水溶液显碱性,可将组织中的酸性物质染成蓝色,如细胞核内的染色质、细胞质内的核糖体、软骨的基质和黏液等。伊红的水溶液显酸性,可将组织中的碱性物质染成红色,如细胞质的普通蛋白质、核仁和胶原纤维等。
染色的步骤是将切片放入二甲苯中使石蜡脱净,然后经乙醇(高浓度至低浓度)入水,再用苏木精和伊红分别染色。
5. 组织切片的染色法 常用的HE 染色法只能显示组织的一般结构,不能显示组织的所有结构。某些结构或成分需用特殊染色法或组织化学方法等才能显示,如网状纤维、嗜银细胞、网织红细胞、线粒体等。
6. 脱水和封固 染色后的切片经乙醇(由低浓度至高浓度)脱水,二甲苯透明后,再在切片上滴加适量树胶,将盖玻片放在树胶上,待干后即可观察和长期保存。
四、观察切片应注意的问题
1. 全面而系统地观察切片 先用肉眼观察切片标本,熟悉标本的大体形态,寻找要观察的大致部位。然后用低倍镜观察标本的全貌、结构层次或组织分布,并选择典型结构,再转高倍镜进一步观察。
2. 建立组织与器官的立体结构图像 一种组织或器官,通过不同部位和方向的切面,所显示的形态和结构通常不完全相同。因此,一般要求观察组织或器官的纵切面与横切面,并尽可能观察不同部位的切面,不要看到一种切面就了事。然后将不同切面的形态特点加以分析与综合,获得一个完整的立体结构图像。
3. 善用比较、分析与综合的方法,提高辨认能力 在组织标本中,有些细胞、组织和器官的形态类似,如中性粒细胞与嗜酸粒细胞,复层扁平上皮与变移上皮,致密结缔组织与平滑肌组织,骨骼肌与心肌组织,淋巴结与脾脏,小肠与结肠,腮腺、颌下腺与胰腺,甲状腺与哺乳期乳腺,子宫增生期与分泌期等。应对其进行比较,经过综合分析,抓住各自的结构特点,从而达到区分不同结构的目的。
4. 理论与实践相联系 有时切片所见与理论描述不完全一致,可能是组织或器官所处的生理状况不同所致,如甲状腺功能亢进时的滤泡细胞呈柱状,而功能低下时则呈扁平形;不同的物种组织结构也不尽相同,如猪的肝小叶边界较人的清楚,狗、猫的小肠腺潘氏细胞甚少或没有,甲状旁腺无嗜酸性细胞,兔、猫卵巢的间质腺较人的发达等;固定剂可致使组织结构发生改变,福尔马林可导致组织膨胀,乙醇可导致组织收缩;取材不及时或组织有病变,则细胞发生肿胀、核固缩,胞质显空泡,甚至有寄生虫等;切片刀有缺口,则造成组织发生纵行裂痕;浸蜡时间过长,则组织脆硬,易产生不规则裂纹;贴片时未充分展开,则组织重叠形成深染的条索状结构。因此,当标本出现与理论描述的形态不同时,应认真思考。
普通生物显微镜的构造、使用和维护实训练习
年 月 日 第 周 星期 总分
一、看图填空(50 分)
a.
b.
c.
d.
e.
f.
g.
h.
i.
j.
图1-01 双目生物光学显微镜
二、跟我学(50 分)
1. 组织制片技术包括和两个基本过程。
2. 组织切片染色的方法较多,*常用的方法为和染色法,简称HE染色法。另外,组织细胞成分被苏木素染成蓝色,称为性;组织细胞成分被伊红染成红色,称为性;组织结构对苏木素和伊红均有一定的亲和力,称为性;用碱性甲苯胺蓝进行染色时,被染成红色,而不染成蓝色,这种色变现象称为性;将组织块置于硝酸银溶液中,细胞将硝酸银还原成银颗粒,在细胞内形成黑色或棕黄色沉积,这一染色特性称为性;若细胞对硝酸银无直接还原能力,需经还原剂处理,产生沉淀而显色,这一染色特性称为性。
3. 根据上述染色的特性,你能区分下列图片中的几种染色特性吗?请用线条将图片与文字连接起来。