目录
●目录
绪论 1
第一节 实验室安全 1
第二节 医学基础科研实验设计原则 4
第一篇 临床生物样本的采集与处理
第一章 临床生物样本采集前工作流程 8
第二章 血液样本的制备 10
第一节 血液样本的采集 10
第二节 血液样本的处理 11
第三章 尿液样本的制备 14
第一节 尿液样本的采集 14
第二节 尿液样本的处理 15
第四章 胸水、腹水样本的制备 16
第一节 胸水、腹水样本的采集 16
第二节 胸水、腹水样本的处理 17
第五章 支气管肺泡灌洗液样本的制备 19
第一节 支气管肺泡灌洗液样本的采集 19
第二节 支气管肺泡灌洗液样本的处理 20
第六章 痰液样本的制备 21
第一节 痰液样本的采集 21
第二节 痰液样本的处理 22
第二篇 分子生物学常用实验技术
第七章 真核细胞核酸分离纯化 24
第一节 基因组 DNA 分离纯化 24
第二节 基因组 DNA 分布检测和片段化 28
第三节 细胞游离 DNA 的提取和质控 34
第四节 RNA 的提取和质控 36
第八章 聚合酶链反应 40
第一节 PCR 40
第二节 反转录 45
第三节 qPCR47
第四节 数字 PCR 50
第九章 DNA 重组克隆技术 53
第一节 DNA 克隆、酶切与连接 53
第二节 感受态细胞制备与转化 57
第三节 质粒的提取纯化鉴定 61
第十章 基因功能研究技术 63
第一节 RNA 干扰技术 63
第二节 基因过表达技术 69
第三节 CRISPR/Cas9 基因编辑技术 73
第十一章 蛋白质检测技术 79
第一节 细胞及组织蛋白质的提取与定量 79
第二节 蛋白质的分离纯化 84
第三节 蛋白质电泳与免疫印迹 88
第四节 酶联免疫吸附试验(ELISA) 93
第五节 蛋白质免疫共沉淀 97
第十二章 基因转录调控 99
第一节 启动子转录活性分析(报告基因实验) 99
第二节 蛋白质与 DNA 相互作用 102
第三节 蛋白质与 RNA 相互作用 106
第四节 DNA 甲基化分析 109
第五节 microRNA 报告基因表达调控检测 112
第三篇 细胞生物学常用实验技术
第十三章 细胞培养 118
第一节 细胞培养条件和无菌培养原则 118
第二节 细胞的传代、复苏与冻存(贴壁细胞 / 悬浮细胞) 121
第三节 细胞计数 123
第四节 原代细胞的分离、培养 125
第五节 细胞三维(3D)培养 128
第十四章 外源基因的细胞导入 136
第一节 质粒的转染 136
第二节 病毒的感染 138
第十五章 细胞表型检测 141
第一节 细胞增殖的检测 141
第二节 细胞的运动检测 151
第三节 细胞氧化应激的检测 153
第四节 细胞代谢的检测 158
第五节 细胞衰老的检测 164
第六节 细胞凋亡的检测 168
第七节 细胞铁死亡的检测 170
第八节 细胞焦亡的检测 173
第九节 细胞的蛋白质表达原位检测 177
第十节 胞外囊泡的分离和鉴定 179
第四篇 组织病理学常用实验技术
第十六章 组织样本的前期处理 184
第一节 组织取材 184
第二节 组织固定 186
第十七章 组织常规制片技术与苏木精-伊红染色技术 190
第一节 组织石蜡包埋与石蜡切片 190
第二节 组织冰冻包埋与冷冻切片 193
第三节 苏木精-伊红染色技术 196
第十八章 常用特殊染色技术 199
第一节 胶原纤维染色 199
第二节 弹性纤维染色 201
第三节 糖原染色 202
第四节 黏蛋白染色 204
第五节 脂类物质染色 205
第六节 骨和软骨染色 206
第十九章 原位蛋白质检测技术 209
第一节 原位蛋白质检测技术概述 209
第二节 免疫组化染色技术 211
第三节 免疫荧光染色技术 215
第四节 多重荧光免疫染色技术 216
第五节 原位蛋白质检测技术的图像采集与数据分析 221
第二十章 原位核酸检测技术 227
第一节 原位核酸分子杂交技术 227
第二节 DNA 原位杂交技术 229
第三节 RNAscope 单细胞单分子水平 RNA定位定量检测技术 230
第二十一章 组织透明化技术 233
第五篇 常用流式细胞术
第二十二章 流式细胞术基本概念 240
第一节 流式细胞术的基本原理 240
第二节 荧光素偶联抗体的选择 242
第三节 荧光补偿 244
第四节 流式数据分析 246
第五节 流式分选 247
第二十三章 流式细胞术的分析应用 250
第一节 细胞表型测定 250
第二节 细胞周期检测 253
第三节 细胞增殖检测 255
第四节 细胞凋亡检测 257
第五节 胞内细胞因子检测 259
第六节 流式微球阵列分析技术测定细胞因子 262
第七节 细胞氧化应激与代谢的流式检测 265
第八节 新兴流式细胞术 268
第六篇 基于高通量的常见组学整体研究策略
第二十四章 高通量测序仪器的发展历程 274
第二十五章 常用高通量测序检测技术 278
第一节 转录组测序 278
第二节 基因组测序 279
第三节 转录调控组测序 280
第四节 转录后调控组测序 281
第五节 DNA 甲基化修饰测序 282
第六节 RNA 甲基化修饰测序 283
第七节 染色质结构测序 285
第八节 染色质互作测序 287
第九节 RNA- 染色质互作测序 289
第二十六章 单细胞测序检测技术 293
第一节 单细胞转录组测序 293
第二节 单细胞基因组测序 297
第三节 单细胞转录调控组(表观组)测序 299
第四节 单细胞多组学测序 301
第二十七章 空间转录组学检测技术 304
内容介绍
《医学常用实验技术》聚焦当今医学相关科学实验的核心需求,旨在为医学科研工作者提供一本兼具实用性、前沿性、工具性与可读性的专业指南。本书内容紧扣医学实验流程,从临床生物样本采集规范,到分子生物学、细胞生物学、免疫学、组织病理学等经典技术,再到生物信息学、医工交叉等新兴技术,覆盖基础至进阶操作,解决“做什么、怎么做”的问题。本书纳入了CRISPR/Cas9基因编辑、单细胞测序、空间转录组学等前沿技术,使经典与新兴方法有机衔接,适配技术更新节奏,为科研创新提供支撑。为便于使用,本书分篇梳理各实验技术板块,目录层次分明,章节结构严谨,并贯穿可操作性原则,每章细化操作步骤,配合图表,同时提供关键细节与“避坑指南”,助力技术快速落地。编者均为一线科研工作者,将多年实战经验归纳总结,期望为医学生及科研人员赋能,架起理论与实践的桥梁。