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生物化学实验(高等学校专业教材,浙江省普通高校“十三五”新形态教材)

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生物化学实验是生物化学课程配套的实验课程,通过让学生动手实践生物物质的分离、分析和鉴定,熟悉物质代谢的研究方法,加深对生物化学知识的理解,提高学生发现问题、分析问题和解决问题的能力,提升学生的整体素养。

本教材编写团队依托浙江师范大学生物学国家级实验教学示范中心、浙江省一流本科课程和浙江省第一批高等学校课程思政示范课程--生物化学实验,根据生物化学课程体系,编写生物物质分离实验、生物物质定量实验、生物物质代谢实验、综合性实验共四章29个实验项目内容。

本教材适合作为食品科学与工程、生物工程、环境工程以及相关专业本科生、研究生教材,也可供相关领域工程技术人员参考阅读。

孙梅好:教授,博士生导师。浙江师范大学化学与生命科学学院副院长,生物学国家级实验教学师范中心副主任,浙江省生物化学与分子生物学学会理事,浙江省植物生理与分子生物学学会理事。负责浙江省一流本科课程”生物化学实验”,主要研究方向为蛋白质的表达调控、结构分析等,在Journal of Biological Chemistry等国内外学术刊物上发表论文20余篇。

蒲首丞:博士。浙江师范大学化学与生命科学学院教师,主要从事生物化学与天然产物化学方向教学科研工作。主持浙江省教育厅项目、浙江省”生物学”重中之重学科开放基金及多个校级教学改革项目,并参加国家自然科学基金项目。

第一章 生物物质分离实验

实验一 氨基酸的分离——纸层析法

实验二 氨基酸的分离——离子交换层析法

实验三 糖的分离——薄层层析法

实验四 血清蛋白的分离——聚丙烯凝胶电泳

实验五 蛋白质的分离——十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)

实验六 荧光蛋白的分离——凝胶层析

实验七 牛乳中酪蛋白的制备与鉴定

第二章 生物物质定量实验

实验一 蛋白质含量的测定——凯氏定氮法

实验二 蛋白质浓度的测定——考马斯亮蓝染色法

实验三 质粒脱氧核糖核酸(DNA)的提取与浓度测定

实验四 可溶性糖含量的测定——蒽酮比色法

实验五 果胶含量的测定——咔唑比色法

实验六 血糖含量的测定——葡萄糖氧化酶法

实验七 粮食中脂肪含量的测定——索氏提取法

实验八 油脂酸价的测定

实验九 油脂过氧化值的测定

实验十 水果中维生素C含量的测定——钼酸铵法

实验十一 植物中过氧化物酶活性的测定

实验十二 植物源酪氨酸酶抑制剂的筛选

实验十三 蔗糖酶米氏常数的测定

第三章 生物物质代谢实验

实验一 乳酸脱氢酶(LDH)活性的测定

实验二 肝匀浆中谷丙转氨酶(GPT)活性的测定

实验三 脂肪酸β氧化的测定

实验四 尿液中尿酸含量的测定——分光光度法

第四章 综合性实验

实验一 苯丙氨酸解氨酶的分离、活性与比活力的测定

实验二 荧光蛋白的表达纯化分析

实验三 小鼠血清清蛋白的分离纯化与纯度鉴定

实验四 细胞色素C的分离纯化与纯度鉴定

实验五 乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的分离纯化

附录

附录一 常用缓冲溶液的配制方法

附录二 常用蛋白质相对分子质量(Mr)标准参照物

附录三 实验室常用酸碱溶液的密度和浓度

附录四 常见蛋白质分子质量参考值

附录五 常见蛋白质等电点参考值

附录六 硫酸铵饱和度常用表

参考文献

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