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T7 RNAi Transcription Kit
用于体外dsRNA 合成
siRNA及长链dsRNA的体外转录;产物可用于RNAi实验
可以转录siRNA和长片段dsRNA;
产量高达20-80 μg;
RNA磁珠可快速高效的纯化转录产物
图1. 500 bp dsRNA 2%琼脂糖凝胶电泳图
1:DL2000 Plus DNA Marker;2和4:500 bp dsRNA酶解前后产物(双端转);3和5: 500 bp dsRNA酶解前后产物(混合转)。
图2. siRNA 12% PAGE电泳检测结果
1:siRNA转录产物;2:siRNA转录双酶消化产物;3:单链模板;4:双链退火模板
图3. siRNA干扰绿色荧光蛋白表达
左图为GFP质粒与negative control GFP siRNA共转染24 h后的293T细胞;右图为GFP质粒和positive GFP siRNA共转染24 h后的293T细胞。
T7 RNA ploymerase可识别带有T7启动子的DNA模版,以四种NTP 为底物,体外转录合成RNA。T7 RNAi Transcription Kit 是在T7 High Yield RNA Transcription Kit 基础上为转录双链RNA 而设计优化的版本,可用于转录21 bp 的siRNA 和长片段的dsRNA。转录产物经纯化后可用于阳离子脂质体、磷酸钙共沉淀、电穿孔、DEAE- 葡聚糖及显微注射等方法介导的RNAi 实验。一般情况下,一个反应可产生20 μg-80 μg 的RNA。
Box 1 于-20℃保存,Box 2 于4℃保存。
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