书名：合成生物学基础实验原理与技术：大肠杆菌篇（牛福星）  
定价：39.8  
ISBN：9787122458339  
作者：牛福星、易弋 主编  
版次：第1版  
出版时间：2024-11  
目录：  
第一章　感受态细胞的快速制备及转化 001  
第一节　感受态细胞的化学法快速制备 003  
一、实验目的 003  
二、实验原理 003  
三、实验材料、试剂与设备 004  
四、实验流程 004  
五、注意事项 005  
六、思考题 005  
第二节　利用热激法制备的感受态细胞进行转化 006  
一、实验目的 006  
二、实验原理 006  
三、实验材料、试剂与设备 007  
四、实验流程 007  
五、注意事项 007  
六、思考题 008  
第三节　感受态细胞的电转化法快速制备 009  
一、实验目的 009  
二、实验原理 009  
三、实验材料、试剂与设备 009  
四、实验流程 010  
五、注意事项 010  
六、思考题 011  
第四节　利用电转化法制备的感受态细胞进行转化 012  
一、实验目的 012  
二、实验原理 012  
三、实验材料、试剂与设备 013  
四、实验流程 013  
五、注意事项 013  
六、思考题 014  

第二章　PCR 扩增及琼脂糖凝胶核酸电泳技术 015  
第一节　常规PCR 技术 017  
一、实验目的 017  
二、实验原理 017  
三、实验材料、试剂与设备 017  
四、实验流程 019  
五、注意事项 019  
六、思考题 020  
第二节　重叠延伸PCR 技术 021  
一、实验目的 021  
二、实验原理 021  
三、实验材料、试剂与设备 021  
四、实验流程 023  
五、注意事项 023  
六、思考题 024  
第三节　定点突变PCR 技术 025  
一、实验目的 025  
二、实验原理 025  
三、实验材料、试剂与设备 025  
四、实验流程 026  
五、注意事项 027  
六、思考题 028  
第四节　琼脂糖凝胶核酸电泳技术 029  
一、实验目的 029  
二、实验原理 029  
三、实验材料、试剂与设备 029  
四、实验流程 030  
五、注意事项 031  
六、思考题 032  

第三章　DNA 提取 033  
第一节　大肠杆菌基因组的提取（机械破胞+ 柱法回收） 035  
一、实验目的 035  
二、实验原理 035  
三、实验材料、试剂与设备 036  
四、实验流程 036  
五、注意事项 037  
六、思考题 037  
第二节　质粒提取（碱裂解+ 柱回收法） 038  
一、实验目的 038  
二、实验原理 038  
三、实验材料、试剂与设备 039  
四、实验流程 039  
五、注意事项 040  
六、思考题 041  
第三节　PCR 产物回收（乙醇沉淀法） 042  
一、实验目的 042  
二、实验原理 042  
三、实验材料、试剂与设备 042  
四、实验流程 043  
五、注意事项 043  
六、思考题 043  
第四节　PCR 产物/ 酶切产物纯化（柱提法） 044  
一、实验目的 044  
二、实验原理 044  
三、实验材料、试剂与设备 044  
四、实验流程 045  
五、注意事项 046  
六、思考题 046  

第四章　工具酶的使用以及载体构建 047  
第一节　限制性核酸酶（DpnⅠ）的使用 050  
一、实验目的 050  
二、实验原理 050  
三、实验材料、试剂与设备 050  
四、实验流程 051  
五、注意事项 051  
六、思考题 052  
第二节　限制性核酸内切酶的使用 053  
一、实验目的 053  
二、实验原理 053  
三、实验材料、试剂与设备 053  
四、实验流程 054  
五、注意事项 055  
六、思考题 055  
第三节　连接酶的使用 056  
一、实验目的 056  
二、实验原理 056  
三、实验材料、试剂与设备 056  
四、实验流程 057  
五、注意事项 057  
六、思考题 059  
第四节　T 载体构建 060  
一、实验目的 060  
二、实验原理 060  
三、实验材料、试剂与设备 061  
四、实验流程 061  
五、注意事项 062  
六、思考题 062  

第五章　阳性转化子的筛选与鉴定 063  
第一节　菌落PCR 鉴定 065  
一、实验目的 065  
二、实验原理 065  
三、实验材料、试剂与设备 065  
四、实验流程 066  
五、注意事项 067  
六、思考题 067  
第二节　基于蓝白斑筛选的载体构建 068  
一、实验目的 068  
二、实验原理 068  
三、实验材料、试剂与设备 068  
四、实验流程 069  
五、注意事项 070  
六、思考题 070  
第三节　基于荧光蛋白报告基因的载体构建和鉴定 071  
一、实验目的 071  
二、实验原理 071  
三、实验材料、试剂与设备 071  
四、实验流程 072  
五、注意事项 072  
六、思考题 073  
第四节　选取载体的重鉴定 074  
一、实验目的 074  
二、实验原理 074  
三、实验材料、试剂与设备 074  
四、实验流程 075  
五、注意事项 076  
六、思考题 076  

第六章　蛋白质表达纯化及鉴定 077  
第一节　蛋白质表达 079  
一、实验目的 079  
二、实验原理 079  
三、实验材料、试剂与设备 079  
四、实验流程 080  
五、注意事项 080  
六、思考题 081  
第二节　细胞收集与破碎 082  
一、实验目的 082  
二、实验原理 082  
三、实验材料、试剂与设备 082  
四、实验流程 083  
五、注意事项 084  
六、思考题 084  
第三节　蛋白质纯化 085  
一、实验目的 085  
二、实验原理 085  
三、实验材料、试剂与设备 085  
四、实验流程 086  
五、注意事项 087  
六、思考题 088  
第四节　SDS-PAGE 电泳 089  
一、实验目的 089  
二、实验原理 089  
三、实验材料、试剂与设备 089  
四、实验流程 091  
五、注意事项 092  
六、思考题 093  

第七章　CRISPR 技术应用 095  
第一节　CRISPR 基因敲除 097  
一、实验目的 097  
二、实验原理 097  
三、实验材料、试剂与设备 097  
四、实验流程 100  
五、注意事项 102  
六、思考题 103  
第二节　CRISPR 基因敲除验证及质粒去除 104  
一、实验目的 104  
二、实验原理 104  
三、实验材料、试剂与设备 104  
四、实验流程 105  
五、注意事项 106  
六、思考题 107  
第三节　CRISPR 基因抑制 108  
一、实验目的 108  
二、实验原理 108  
三、实验材料、试剂与设备 108  
四、实验流程 109  
五、注意事项 110  
六、思考题 110  
第四节　CRISPR 基因激活 111  
一、实验目的 111  
二、实验原理 111  
三、实验材料、试剂与设备 112  
四、实验流程 112  
五、注意事项 113  
六、思考题 114  

附录一　常用培养基配方 115  

附录二　常用限制性内切酶 119  

附录三　思考题参考答案 123  

参考文献 139